Справочник »» Подробно о лекарствах »» FIC Medical »» Хофитол
 Здоровый образ жизни с современными технологиями Соглашение об использовании 

Приложение

Исследование составов фракций и субфракций основных липопротеинов крови, измеренных методом малоуглового рентгеновского рассеяния, у пациентов с мягкой и умеренной ГХС до и после приема препарата Хофитол

Согласно данным экспериментальных и эпидемиологических исследований, обнаружена выраженная связь между высоким уровнем холестерина (ХС) сыворотки крови, особенно ХС липопротеинов низкой плотности (ЛНП), низким уровнем ХС липопротеинов высокой плотности (ЛВП) и развитием атеросклероза [1, 2, З]. Кроме того, широко обсуждается, что повышенные уровни трнглицеридов (ТГ) и линонротеинов очень низкой плотности (ЛОНП) также являются атерогенными [4]. Однако вероятность развития атеросклероза может быть различной у людей со сходными концентрациями лииидов и другими факторами риска [5]. Некоторые из этих различий могут быть обусловлены гетерогенностью каждого из основных классов липопротеинов (ЛП), состоящих из отдельных субфракций, различных как но физико-химическим свойствам, так и по биологическим функциям [6, 7].

Проведены единичные исследования субфракционного состава основных ЛП крови [6, 7], выявлены связи повышенных концентраций мелких плотных ЛОНП, ЛНП и ЛВП с риском развития атеросклероза [8, 9]. В этом плане наиболее изучены субфракции ЛНП. Показано, что с увеличением плотности субфракций ЛНП увеличивается содержание в них свободного ХС и сто эфиров. Мелкие плотные субфракции ЛНП слабо связываются с В/Е рецепторами in vitro, длительное время присутствуют в плазме in vivo, вызывают накопление ХС в культивируемых гладкомышечных клетках и демонстрируют низкую резистентность к окислению [10,11]. Таким образом, мелкие плотные частицы ЛНП являются наиболее атерогенными.

В этих немногочисленных исследованиях субфракции основных ЛП крови были идентифицированы различными методами: ультра центрифугированием в градиенте плотности [12], электрофорезом в градиентном геле [13], с помощью ядерно-магнитного резонанса [14] и т.д. Однако, длительность по времени и трудоемкость этих методов ограничили их широкое использование в клинической практике.

Целью настоящего исследования было оценить состав фракций и субфракций основных ЛП крови с помощью принципиально нового разработанного метода с умеренной ГХС до и после приема препарата Хофитол.

Разработанный экспресс-метод количественной и качественной оценки фракционного и субфракционного состава основных липопротеинов крови с помощью МУРР на дифрактометре фирмы «Siemens» [15, 16, 17] характеризуется высокой точностью и позволяет определить концентрации общего ХС, ТГ, Л ВП-ХС, ЛНП-ХС сыворотки крови, концентрации ХС, ТГ, величину отношения ХС/ТГ в каждой из 5 субфракций ЛОНП, 3 субфракций ЛНП, 5 субфракций ЛВП. Новый метод имеет ряд преимуществ перед существующими методами оценки субфракционного состава липопротеинов крови. Он отличается экспрессивностью (1 ч. на 1 анализ), простотой реализации, использованием всего одного реактива (вещества-контрастера типа сахарозы), высокой разрешающей способностью, для анализа требуется 50 мкл сыворотки крови. Таким образом, разработанный метод является пригодным для проведения крупномасштабных клинических исследований.

В настоящем исследовании с целью сравнения были проведены два параллельных измерения концентрации общего ХС крови, ЛВП-ХС и ТГ крови разными методами - классическим биохимическим и методом МУРР (Табл. 1). Выявлена сильная положительная корреляция (Р<0,05) между двумя методами. Изменений в концентрациях общего ХС крови, ЛВП-ХС, ЛНП-ХС и ТГ крови, измеренных методом МУРР, у пациентов с мягкой и умеренной ГХС до и после приема препарата Хофитол отмечено не было.

В Табл. 2 и на Рис. 1 представлены результаты измерения методом МУРР концентрации ХС в отдельных фракциях и субфракциях основных ЛП крови у пациентов с мягкой и умеренной ГХС до и после приема препарата Хофитол. Выявлены два однонаправленных перераспределения концентраций ХС в мелких плотных частицах ЛОНП (ЛОНП-4 иЛОНП-5) в сторону увеличения количества ХС в ЛОНП-5 и в мелких плотных частицах ЛВП (ЛВП-4 иЛВП-5) в сторону увеличения количества ХС в ЛВП-5 после приема Хофитола.

Подобные изменения в мелких плотных частицах ЛОНП и ЛВП отмечены и при исследовании концентрации ТГ в субфракциях ЛП методом МУРР (Табл. 3 и Рис. 2). Так, у пациентов с мягкой и умеренной ГХС после приема препарата Хофитол обнаружены снижения концентраций ТГ в ЛОНП-4 и ЛВП-4 и повышение уровня ТГ в ЛОНП-5 (Р<0,05).

Величина отношения ХС/ТГ в субфракциях ЛОНП у пациентов с ГХС после приема Хофитола снизилась на 50% в ЛОНП-2 и повысилась на 166% в ЛОНП-4 (Р<0,05). Этот показатель оказался повышенным и в мелких плотных частицах ЛВП (Р<0,05) у пациентов с ГХС после приема препарата Хофитол (Табл. 4 и Рис. 3).

Таблица 1. Сравнительные данные двух параллельных измерений липидов сыворотки крови методами «сухой химии» (на аппарате «Cholesteich») и МУРР у пациентов с мягкой и умеренной ГХС до и после приема препарата Хофитол.

Показателеи

ХС (мг/дл) до
приема
препарата

 

М ± m
σ
Min / Мах

«Сухая химия»

256Л ±5,7
30,9
206 / 339

МУРР

238,9 ±5,9
31.9
191 / 299

Разница в%*

- 6,7 %

Корреляция **

+ 0,74 ***

ХС (мг/дл)
после приема
препарата

М±m
σ
Min / Мах
Разница в %

252,2 ± 6,8
36,6
149/ 309
-1,4%

233,8 ±6,1
33,0
167 / 298
-2,2%

- 7,2 %

+ 0,69 ***

ТГ (мг/дл) до
приема
препарата

М ±m
σ
Min / Мах

160,0± 14.7
79,2
59 / 435

198,4 ±12,3
66,2
105/420

+ 24 %

+ 0,91 ***

ТГ(мг/дл)
после приема
препарата

М ± m
σ
Min / Мах
Разница в %

166,0± 12,3
66,1
66 / 354
-3,7%

192,0± 11,4
61,5
105 / 329
-3%

15.7 %

+ 0,87 ***

ЛВП-ХС
(мг/дл) до
приема
препарата

М ± m
σ
Min / Мах

53,2±2,4
13.2
28 / 92

57,4 ± 3,3
17,8
20/ 119

+8,3 %

+0,64 ***

ЛВП-ХС
(мг/дл) до
приема
препарата

М±m
σ
Min / Мах
Разница в %

53,2 ±3,1
16,5
24 / 100
0%

54,9 ±2,4
13,1
35 / 102
-3,7%

+3.5 %

+0,55 ***

ЛВП-ХС
(мг/дл) до
приема
препарата

М ± m
σ
Mill / Мах

170,6±5,5
29,5
106 / 238

148,3 ± 5,2
27,8
80 / 194

-13,3 %

+0.76 ***

ЛНП-ХС
(мг/дл) до
приема
препарата

М ±m
σ
Min / Мах
Разница в %

169,9±6,0
32,5
102 / 232
-0,1%

145,2 ± 4,8
25,8
81 / 189
-1,9%

-14,6 %

+0,67 ***


* - разница в % между измерениями методами «сухой химии» и МУРР;
** - коэффициент корреляции между двумя измерениями методами «сухой химии» и МУРР;
*** - достоверность корреляции при Р<0,05.

Таблица 2. Концентрация ХС (мг/дл) в субфракциях липопротеинов, измеренная методом МУРР, у пациентов с мягкой и умеренной ГХС до и после приема препарата Хофитол.

Субфракции

До Хофитола

После Хофитола

Разница в %

ЛОНП

33,1 ±3,3

33,8±4,7

+2%.

ЛОНП-1

1,2 ±0,5

0,9 ± 0,3

-7%

ЛОНП-2

3.9± 1,2

3,2±0.8

-20%-

ЛОНП-3

7,8± l,4

9,0±1,5

+12,5%

ЛОНП-4

7,6 ± l,9

4,4 ±1,7

-45%

ЛОПП-5

12,5± 2,2

18,5±3,4

+54%

ЛПП

30,2 ± 3,6

28,8±3,5

-4%

ЛНП

170,6±5,5

169,9±6,0

-0,5%

ЛHП-1

28,4±4,7

26,2± 3,6

-6%

ЛHП-2

32,1±5,6

26,6±5,1

-17%

ЛИП-3

44,5 ±4.0

47,5 ±5,1

+8%

ЛВП

57,4 ± 3,3

54,9±2,4

-3,7%

ЛВП-1

26,5 ± 3,7

21,1±3,0

-19%

ЛВП-2

12,3 ± 2,2

11,3 ± 1,9

-6%

ЛВП-3

6,8± 1,5

6,4 ± 1,2

-9%

ЛВП-4

2,6± 0,7

1,8±0,5

-40%.

ЛВП-5

9,1 ± 1,2

13,2±2,4

+47%.


Таблица 3. Концентрация ТГ (мг/дл) в субфракциях липопротеинов, измеренная методом МУРР, у пациентов с мягкой и умеренной ГХС до и после приема препарата Хофитол.

Субфракции

До Хофитола

После Хофитола

Разница в %

ЛОНП

100,3± 12,1

95,0 ± 12,3

-5%

ЛОНП-1

9,2± 3,3

7,2 ± 2,4

-20%

ЛОНП-2

22,0 ± 6,8

16,7 ±4,3

-24%

ЛОНП-3

27.4 ± 4,8

29,6± 5,3

+10%

ЛОНП-4

19,8 ±4,9

8,6± 3,7*

-57%

ЛОНП-5

22,9± 4,0

33,4 ±6,0*

+45%

ЛПП

32,1 ± 3,8

31,3±3,9

-2%

ЛНП

75,8±3,4

74,7±3,9

-2%

ЛНП-1

19,8± 3,6

16,1± 2,3

-20%

ЛHП-2

11,7+2,0

10,7 ± 2.0

-11%

ЛНП-3

11,6 ±1,1

12,7±1,3

+15%

ЛВП

22,3 ±1,1

22,4 ± 1,0

0%.

ЛВП-1

8,4 ± 1,2

8.0± 1,5

-1%

ЛВП-2

4,8± 0,8

5,5± 1,4

+10%

ЛВП-3

2,8 ± 0,6

2,8±0,5

0%.

ЛВП-4

1,6±0,4

0,8 ±0,3

-50%

ЛВП-5

5,5±0,7

7,8± 1,5

142%


* - отличие от показателя до приема препарата при Р<0,05.

Таблица 4. Величина отношения ХС/ТГ в субфракциях липопротеинов, измеренная методом МУРР, у пациентов с мягкой и умеренной ГХС до и после приема препарата Хофитол.

Субфракции

До Хофитола

После Хофитола

Разница в %

ЛОНП

0,35 ±0.01

0.35 ±0,02

0%

ЛОНП-1

0,08 ±0.02

0,08 ± 0.02

0%

ЛОНП-2

0,2 ±0.01

0,1±0,02*

-50%

ЛОНП-3

0,3 ±0,01

0,5±0.2

+67%

ЛОНП-4

0,3 ±0.03

0,8 ± 0.4*

+166%

ЛОНП-5

0,5 ± 0.02

0,5± 0,02

0%

ЛПП

0,9 ±0,01

1,3 ±0.4

+44%

ЛНП

2,0 ± 0,06

2.0 ± 0.1

0%

ЛНП-1

1,6 ±0,07

1,7 ±0,006

+6%

ЛНП-2

2,7 ± 0,03

2,6 ± 0.1

-4%

ЛНП-3

3,8 ± 0,04

3,7 ±0,1

-3%

ЛВП

2,5±0.04

2.4 ± 0,05*

-4%

ЛВП-1

3,1 ±0.07

3,0 ±0,1

-3%

ЛВП-2

2,4 ±0.1

2,5 ±0,1

+4%

ЛВП-3

2,4 ± 0,1

2,1 ±0,1*

-12%

ЛВП-4

1,8 ± 0,2

2,2 ±0,1*

+22%

ЛВП-5

1,6 ± 0,04

1,7 ±0.03*

+6%


*-отличие от показателя до приема препарата при Р<0,05.

Таким образом, в настоящем исследовании с помощью метода МУРР нами выявлены изменения субфракционного состава преимущест венно в мелких плотных частицах ЛОНП и ЛВП у пациентов с мягкой и умеренной ГХС после приема препарата Хофитол.

Литература:
1. К.М. Anderson, W.P. Castelli, D. Levy. Cholesterol and mortality. 30-year follow-up from the Framingham study. J. Am. Med. Assoc. 1987, № 257, p. 2176-2180.
2. А.Н. Климов, H.I. Никулъчева. Липиды, липопротеиды и атеросклероз. - С-Петербург: Питер Пресс, 1995, c. 185-226.
3. Н.В. Перова. Суммарный риск ишемическои болезни сердца и показания к лечению гиперхолестеринемии. Кардиология, 1996, № 3, 47-53.
4. R.I. Havel. Role, of triglyceride-rich lipoproteins in progression of arteriosclerosis. Circulation. 1990, № 82, p. 694-696.
5. D.S. Freedman, J. Croft, A.J. Anderson et al. The association of coronary artery disease with. levels of total and high-density lipoprotein cholesterol. Epidemiology. 1994, № 5, с. 80-87.
6. M.J. Chapman, P.M. laplaud, G. Luc et al. Further resolution of the low density lipoprotein spectrum in normal human plasma: physicochemical characteristics of discrele subspecies separated by density gradient ultracentrifugation. J. Lipid Res. 1988, № 29, p. 442-458.
7. J.D. Otvos, E.J. Jeyarajah, D.W. Bennett spectroscopic approach to lipoprotein subclass analisis. J. clinical ligand assay. 1996,№ 19, p. 184-189.
8. H. Campos, E. Blijievens, J.R. McNamara et al. LDL particle size distribution. Arterioscler Thromb. 1992, № 12, p. 1410-1419.
9. R.M. Krauss. Low-density lipoprotein subclasses and risk of coronary artery disease. Curr Opin Lipidol. 1991, № 2, p. 248-252.
10. M.A. Austin, J.L. Breslow, C.H. Hennekers et al. Low density lipoprotein subclass patterns and risk of myocardial infarc-tion. JAMA. 1988, № 260, p. 1917-1921.
11. Ю.П. Никитин, М.И. Душкин, Ю.И. Рагино. Резис-тентностъ к окислению субфракций липопротеинов низкой плотнocmu у больных ишемической болезни сердца. Кардиология. 1998, № 10. с. 48-52.
12. M.J. Chapman, S. Lund-Katz, M.C. Phillips et al. LDL subfraclions: properties and junctions. Arteriosclerosis X. 1995, p. 977-979.
13. P.T. Williams, R.M. Krauss, K.M. Vranizum et al. Associations of lipoproteins and apolipoproteins with gradient gel electrophoresis estimates of high density lipoprotein subfrac-tions in man and women. Arterioscler. Thromb. 1992, № 12, p. 332-340.
14. J.D. Otvos, E.J. Jeyarajah, D.W. Bennett. Quanlification of plasma lipoproteins by proton nuclear magnetic resonance spectroscope. //Clin. Chem. 1991, № 37, p. 377-386.
15. Ф.В. Тузиков, Н.А. Тузикова, Ю.H. Мистюрин. Заявка № 93056527 "Способ определения фракционного состава липопротеинов крови",МКИ GOIN33/53. Приоритет от 22.12.93г. Положительное решение от 30.10.96г.
16. Ф.В. Тузиков, 11.Л. Тузикова, Ю.Н. Мистюрин. Заявка № 2099693 "Способ анализа липопротеинов в плазме крови методом малоуглового рентгеновского рассеяния". Приоритет от 22.12.93г. Положительное решение от 20.12.97г.
17. Ф.В. Тузиков, Н.А. Тузикова, Л.Е. Панин, Ю.П. Никитин. Определение фракционного состава липопротеинов крови методом малоуглового рентгеновского рассеяния. //Биологические мембраны. 1998, № 4, с. 420-432.

 Здоровый образ жизни с современными технологиями Соглашение об использовании 
o1
Справочник »» Подробно о лекарствах »» FIC Medical »» Хофитол